1.原理

該檢測方法可用于特異性檢測β-木聚糖酶的活力。用木聚糖酶孵育Azo-木聚糖，底物發(fā)生分解，產(chǎn)生低分子量染色片段，與工業(yè)甲基化酒精（IMS,95% v/v）或乙醇(95% v/v)形成反應(yīng)混合物。離心去除高分子量產(chǎn)物，對上清液進行檢測。木聚糖酶的活力可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中獲得。

2．底物

首先將燕麥木聚糖純化（去除淀粉），然后用藍(lán)色染料R染色，1分子染料連接30分子糖基。

3.底物溶解

將2g粉狀底物加入到帶加熱板和磁力攪拌棒攪拌的80mL劇烈沸騰的水中，之后關(guān)閉熱源，繼續(xù)攪拌，直至多聚糖*溶解（約20min）。定容至100ml，加入0.02g疊氮花鈉，并使其溶解。該溶液4℃下可保存12個月（無酶污染情況下）。使用前應(yīng)振蕩試劑瓶，該溶液是粘性的，應(yīng)用容積式移液器移?。ㄈ?span>Eppendorf Multipette® with a 5.0 mL Combitip）。

4.沉淀劑溶液

工業(yè)甲基化酒精（95%v/v）或乙醇（95%v/v）。