馬鈴薯病毒檢測實驗的準備工作及樣品的提取和稀釋
馬鈴薯病毒檢測實驗的準備工作
實驗前將抗體包被在微孔板上
根據(jù)抗體標簽上標識的稀釋倍數(shù),用1倍的包被緩沖液稀釋抗體?;旌暇鶆?/div>
請根據(jù)使用量來確定抗體稀釋液體積
注意:1個反應孔需要100ul的抗體稀釋液。1ml的抗體稀釋液足夠8個反應孔使用,10ml的抗體稀釋液夠96個反應孔使用。
在聚乙烯材質(zhì)的容器中制備抗體溶液。(避免抗體黏附的容器上)??贵w溶液準備好后需立即包被,否則抗體可能會部分失效。
抗體稀釋液不能存放,配制好后請立即使用。
包被抗體
在每個反應孔中加入100ul抗體稀釋液
孵育
在恒濕箱中,室溫下(25℃)孵育4小時或在4℃條件下過夜
洗板
孵育結束后,將反應孔中的試劑倒出
加入250ul的1倍PBST緩沖液,之后快速倒出,重復4-8次
將微孔板倒扣在吸水紙上以控干孔中殘留液體
馬鈴薯病毒檢測樣品的提取及稀釋
樣品的提取
盡可能選擇出現(xiàn)癥狀的植物組織作為樣品,通常將葉片作為ELISA實驗的檢測樣品,其它植物組織也可用于ELISA實驗
在1個反應孔中加入多片葉片的提取液會使實驗更經(jīng)濟一些,但卻降低了實驗的靈敏度。如對樣品提取有任何疑義請與本公司聯(lián)系
若用研缽提取樣品,在每份樣品提取后請*清洗研缽,以免造成樣品間的相互污染
絕大多數(shù)樣品,可使用通用樣品提取緩沖液。但有些植物(葡萄、藍莓等)必須使用特殊的提取緩沖液。如對樣品提取緩沖液有任何疑義請與本公司聯(lián)系
樣品的稀釋
樣品研磨后,將樣品提取液與提取緩沖液以1:10(樣品提取液體積:提取緩沖液體積)的比例混合均勻?;蛞?:10(樣品質(zhì)量:提取緩沖液體積)的比例在提取緩沖液中研磨樣品
每個反應孔需要100ul的樣品提取稀釋液。多準備一些樣品提取稀釋液以利于吸取
以上便是今天關于馬鈴薯病毒檢測實驗的準備工作及樣品的提取和稀釋的全部分享了,希望對大家今后使用本設備能有幫助。